**Consultar tarifas con la unidad
Selección de poblaciones de aptámeros específicos frente a la diana
Se seleccionarán poblaciones de aptámeros frente a una diana utilizando la metodología SELEX apropiada. Se realizarán hasta 12 rondas de selección. Se medirá el enriquecimiento de cada una de las poblaciones obtenidas tras las sucesivas rondas de selección. Se suministrará la población enriquecida en aptámeros que reconozcan la diana
Identificación mediante NGS y caracterización estructural in silico de aptámeros
Se secuenciará la población enriquecida en aptámeros frente a la diana, se analizará la estructura secundaría de los aptámeros identificados y se sintatizarán hasta 4 aptámeros representativos
Confirmación de la interacción y estudio de la afinidad por SPR (4 aptámeros)
Se confirmará la interacción de los aptámeros seleccionados y se estudiará la afinidad de los mismos sintetizados quimicamente mediante SPR. Se entregará la secuencia de los aptámeros que muestren mayor afinidad por la diana
Optimización de aptámeros
Se estudiará la estructura de los aptámeros y se diseñaran aptámeros modificados mediante la eliminación de secuencias que no alteren la estructura activa del mismo.
Estabilidad in vitro: 1. En plasma humano, rata y mono (NHP); 2. Estabilidad frente a nucleasas (λ-exonucleasa y DNAsa I)
Se confirmará la interacción de los aptámeros seleccionados y se estudiará la afinidad de los mismos sintetizados quimicamente mediante SPR. Se entregará la secuencia de los aptámeros que muestren mayor afinidad por la diana.
Toxicidad in vitro: evaluación de la citotoxicidad de los aptámeros mediante la cuantificación de MTT y LDH
Se evaluará la toxicidad de las muestras en cultivos celulares mediante cuantificación de MTT y LDH
Ensayos funcionales
Se realizarán estudios que permitan conocer la actividad agonista o antagonista de los aptámeros utilizando los modelos apropiados
Asesoría técnica y apoyo técnico
Asesoramiento relacionado con tecnología de aptámeros. Puesta a punto de nuevos protocolos. Formación e implementación de técnicas específicas. Soporte técnico y metodológico.